有人問:“激發(fā)濾光片光譜和發(fā)射濾光片光譜的區(qū)別?”
我們都知道在PCR熒光分析儀器中,光學(xué)元器件主要是有激發(fā)濾光片,二向鏡以及發(fā)射濾光片組成的,但是具體的濾光片光譜有什么不一樣呢?
激發(fā)濾光片光譜可以分析在不同激發(fā)濾光片波段下,物質(zhì)的特定波段下熒光的強(qiáng)弱變化。
熒光激發(fā)濾光片光譜的形狀與發(fā)射濾光片波段無關(guān)。通過測量熒光體的某個波長發(fā)光強(qiáng)度隨發(fā)光濾光片波長的變化而獲得的光譜一般歸納為激發(fā)濾光片光譜。
通過使不同濾光片波長的入射光照射激發(fā)熒光體,發(fā)出的熒光通過所需要波長的發(fā)射濾光片過濾后傳遞到到光電檢測器上,獲得熒光強(qiáng)度,記錄光強(qiáng)度對激發(fā)光波長的關(guān)系曲線,即為激發(fā)光譜。
通過對比激發(fā)光譜,選擇最佳激發(fā)濾光片波段獲得相應(yīng)發(fā)射熒光強(qiáng)度最大的激發(fā)光濾光片波段。
發(fā)射濾光片光譜可以分析在固定激發(fā)濾光片波段下,物質(zhì)的熒光強(qiáng)度與波長的關(guān)系。熒光發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長無關(guān)。
通過測量光體的發(fā)光強(qiáng)度隨發(fā)射光濾光片波段的變化而獲得的光譜,稱為發(fā)射光譜。固定激發(fā)光的波長,掃描發(fā)射光的波長,記錄發(fā)射光強(qiáng)度與發(fā)射光波長的關(guān)系曲線,即為發(fā)射光。