PCR熒光分析顯微鏡是由激發(fā)濾光片，二向色鏡以及發(fā)射濾光片組成的光學儀器，通常被設(shè)計來匹配特定熒光團或熒光蛋白的光譜。同時濾光片也可能會安裝在一個轉(zhuǎn)輪（稱為濾光片轉(zhuǎn)盤）上組成一個多通道濾波片組合。

濾光片輪盤您可以混合搭配，盡可能匹配我們所需要的激發(fā)和發(fā)射波長。最終的作用是是捕獲到希望從結(jié)合靶標的熒光基團光束上捕獲的光信號，同時盡可能屏蔽其它部分的任何光線（環(huán)境光，激發(fā)光源等）干擾。

PCR熒光成像使用的濾光片有哪些類型呢？

通常情況下，濾光片組被設(shè)計成可用于捕獲制定熒光團的最大激發(fā)和發(fā)射波長，但不會捕獲所有的熒光。

多數(shù)現(xiàn)代化濾光片組的設(shè)計旨在確保激發(fā)濾光片允許制定波長區(qū)間的光線通過。這種類型的濾光片稱為帶通濾光片。

帶通濾光片通常通過中間波長和區(qū)間寬度確定。在較為簡單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線離開激發(fā)濾光片，即會照射到靶標上，靶標上的熒光激團隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對于激發(fā)光線）遷移的光線，并非所有此類發(fā)射光線都會被檢測器捕獲到——僅哪些允許通過二向色鏡且能通過發(fā)射濾光片的光線。

發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或者長波通濾光片，具體取決于特定的熒光團和成像實驗。如果您希望讓超過特定波長的光線通過檢測器，可選擇長波通濾光片。

一款好的PCR熒光分析通道濾光片在臨床診斷上儀器的穩(wěn)定性和檢測準確性、檢測靈度當然是首選的指標，在科研上熒光定量PCR其意義在于對后續(xù)研究的指導性，數(shù)據(jù)越準確，對后續(xù)研究的指導性就越高。結(jié)果偏差越大的儀器反而會誤導用戶。

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